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首页 > 技术文章 > ELISA试剂盒在保存和使用过程中容易出现哪些问题,又该如何解决?在保存方面,温度是关键因素。ELISA试剂盒通常需2 - 8℃冷藏保存,若保存温度过高,试剂盒内的抗体、酶等生物活性成分可能失活,导致检测灵敏度下降甚至检测失败;而温度过低,试剂可能结冰,破坏其分子结构。解决办法是务必使用精zhun控温的冰箱保存,定期检查冰箱温度,可配备温度监控设备,一旦温度异常能及时察觉并调整。
在使用过程中,加样环节易出问题。加样量不准确,过多或过少都会使检测结果偏离真实值。比如加样量过多,可能导致反应体系中抗原抗体比例失衡,显色过深,定量结果偏高;加样量过少,则显色不足,定量结果偏低。这就要求使用前校准移液器,确保其精度,操作时保持移液器垂直,缓慢匀速加样,避免产生气泡。
孵育条件不当也较为常见。孵育温度和时间不符合说明书要求,会影响抗原抗体结合反应的进行。温度过高,反应速度加快但可能产生非特异性结合;温度过低,反应缓慢甚至不完全。孵育时间过长,可能导致本底升高;时间过短,反应不充分。解决方式是严格按照试剂盒说明书设定孵育温度和时间,使用精度高的恒温设备,如恒温培养箱,并设置闹钟提醒,防止孵育时间差错。另外,洗涤不彻di会残留未结合物质,干扰检测结果,所以要严格按照规定的洗涤次数和方式操作,确保彻di去除杂质。